公司新聞 | 經(jīng)典品讀匯 《豬病學(xué)》第11版之“豬支原體肺炎”篇（上）
概述 豬肺炎支原體（Mycoplasma hyopneumoniae，Mhyo）只感染豬并且無(wú)處不在，幾乎在所有國家和養豬場(chǎng)都能發(fā)現，這些養殖場(chǎng)也并沒(méi)有因感染覆滅。它是被稱(chēng)為慢性潛伏性支氣管肺炎EP（又叫地方性肺炎）的主要致病因子。它長(cháng)期定植在氣管纖毛的上皮細胞，抑制先天性和獲得性免疫反應。這使得上呼吸道共生細菌如多殺性巴氏桿菌、豬鏈球菌、副豬嗜血桿菌等在肺部增殖并加劇疾病。EP的特征是慢性、高發(fā)病率、低死亡率和降低畜體性能。EP對經(jīng)濟效益的影響比較顯著(zhù)，主要表現在降低平均日增重、增加料肉比和延長(cháng)飼養到出欄屠宰的天數。EP主要發(fā)生在分階段飼養的生長(cháng)育肥豬中，有時(shí)也會(huì )發(fā)生在連續生產(chǎn)的保育階段。此外，當與引起PRDC的部分病毒性病原體相互作用時(shí)，豬肺炎支原體也能導致由特定病毒性病原體包括PRRSV、PCV感染所引起的疾病。雖然大多數豬群都是地方性感染豬肺炎支原體，但它進(jìn)入陰性群體中時(shí)，又可以同時(shí)感染各個(gè)年齡段的豬只。 病原學(xué) 豬肺炎支原體最早分離在半個(gè)世紀前(Goodwin et al. 1965; Mare and Switzer 1965)，并一直認為是EP的病因。由于營(yíng)養需求高、生長(cháng)速度慢及其它細菌的污染（特別是豬鼻支原體），豬肺炎支原體在體外很難生長(cháng)。廣泛用于肺炎支原體培養的培養基由FRIIS（1975）開(kāi)發(fā)的，里邊含有大量抗生素、豬、馬源血清、酵母提取物、pH指示劑等化合物。最近Cook等人（2016）通過(guò)加入卡那霉素來(lái)抑制豬鼻支原體，從而優(yōu)化培養基(Anderson et al. 2016a)。 豬肺炎支原體比其它的支原體體外生長(cháng)要慢，并且難以分離。雖然一般通過(guò)培養方式分離豬肺炎支原體，但并不能作為常規診斷方法。最佳的培養樣本有典型的肺炎病變和周?chē)５姆谓M織、支氣管拭子。接種FRIIS肉湯培養基后，對培養基進(jìn)行連續稀釋?zhuān)⑦B續監測3-30天或更長(cháng)時(shí)間，讓其充分生長(cháng)。生長(cháng)情況通常通過(guò)觀(guān)察培養基顏色變化來(lái)判斷，也可以使用ATP光度法精確測量(Calus et al. 2010)。將培養液接種到固體瓊脂培養基上進(jìn)行克隆，這可能需要幾天到幾周的時(shí)間，其形態(tài)最好用體視顯微鏡進(jìn)行觀(guān)察。單個(gè)的豬肺炎支原體菌落要通過(guò)PCR的方法進(jìn)行鑒定（Stakenborg et al.2006a），或者接種Friis肉湯培養后通過(guò)其他方法鑒定、收獲和儲存。 豬肺炎支原體菌株具有抗原性和遺傳多樣性。最初人們懷疑豬肺炎支原體缺乏復制能力，最并通過(guò)血清學(xué)（Ro和Ross 1983）、指紋圖譜（Kokotovic et al.1999）、臨床表現(Vicca et al. 2003)和體外生長(cháng)情況(Meyns et al. 2007)進(jìn)行驗證。在分子水平上主要是通過(guò)測序編碼主要粘附蛋白P146的特定VNTR基因序列（Mayor et al.2007）、限制性?xún)惹忻该赶蟮钠伍L(cháng)度（Kokotovic et al.1999）; Stakenborg .2006b），或分析各種基因座中VNTR模式（Dos Santos et al.2015b; Nathues et al. 2011; Stakenborg et al.2005b; Vranckx et al.2011）來(lái)鑒定豬肺炎支原體特性。在感染豬群中，豬肺炎支原體菌株毒力會(huì )有不同，但高毒力菌株引起更嚴重的肺炎(Meyns et al. 2007; Vicca et al. 2003; Woolley et al. 2012)。高毒力菌株的高致病性主要歸因于其在肺部更高的復制能力和更嚴重的炎癥誘導過(guò)程 (Meyns et al. 2007)。 流行病學(xué) 豬肺炎支原體引起的豬群感染幾乎遍布每個(gè)養豬的國家。其流行性雖然很高，但幾乎沒(méi)有公布出來(lái)的具體流行數據。瑞士例外，在完成國家層面的根除計劃后，其流行率不到1% (St?rk et al. 2007)；可是還偶爾能在家豬和野豬中檢測到豬肺炎支原體(Kuhnert and Overesch 2014; Kuhnert et al. 2011)。家豬與野豬群間的交叉傳播尚無(wú)記錄。 豬肺炎支原體可以在各階段豬只鼻腔和氣管上皮定植(Goodwin 1972)。其隨被感染動(dòng)物的鼻腔分泌物排出，通常通過(guò)鼻-鼻的接觸傳播方式，在易感豬只間傳播(Calsamiglia and Pijoan 2000; Rautiainen and Wallgren 2001)，但這種傳播方式效率低，速度慢。研究表明，通過(guò)連續接觸 4-6 周，1只被感染幼齡豬可以傳播給1-2 頭(Meyns et al. 2004; Roos et al. 2016; Villarreal et al. 2011)。豬肺炎支原體的定植時(shí)間很長(cháng)，通常達7-8 個(gè)月(Pieters et al. 2009)。在此期間，豬可能會(huì )或不會(huì )表現出臨床肺炎癥狀，這由多種因素決定，主要包括菌株毒力、感染劑量、宿主免疫力、并發(fā)的細菌或病毒引起的感染和環(huán)境(參考“發(fā)病”章節)。盡管在整個(gè)感染過(guò)程中，豬肺炎支原體的排放和濃度的一致性可能會(huì )隨著(zhù)時(shí)間變化，但似乎仍對其它動(dòng)物具有傳染性。暴露于具有EP臨床癥狀豬只環(huán)境中的幼齡仔豬，感染豬支原體肺炎的比率要明顯高于暴露于具有亞臨床癥狀豬只環(huán)境中的比率(Pieters et al. 2009)。 豬群中肺炎支原體最常見(jiàn)的感染方式是通過(guò)引入被感染豬只，通過(guò)緊密的直接接觸傳給陰性豬只。但幾十年來(lái)，人們一直懷疑豬肺炎支原體的空氣傳播(Goodwin 1985)，并確定可以短距離傳播(Fano et al. 2005)。Otake 等人證實(shí)，距離感染豬場(chǎng) 9.2 千米處的空氣中攜帶的Mhyo仍能感染已接種免疫動(dòng)物。對丹麥無(wú)特定病原體（SPF）系統的大量研究發(fā)現，畜群的再次感染通常發(fā)生在有利于氣溶膠傳播的秋季和冬季(Jorsal and Thomsen 1988)。目前通過(guò)胎盤(pán)垂直傳播的情況尚不清楚，而通過(guò)運輸工具傳播的風(fēng)險也認為是很小。 一旦感染豬肺炎支原體，豬群就會(huì )持續受到感染。因為要不斷更新畜群，這就會(huì )造成病原在基礎豬群、外購豬和自留后備豬群間的傳播。在哺乳期間，母畜通過(guò)鼻腔分泌物將病原傳播給后代(Calsamiglia and Pijoan 2000; Fano et al. 2007; Rautiainen and Wallgren 2001)。母豬散播Mgyo的比例隨著(zhù)胎次增加而降低。一項研究顯示，一胎母豬散播病原比例為 73%、2-4胎為 42%、6-7 胎位 50%、8-11胎下降到 6% (Calsamiglia and Pijoan 2000)。在另一項研究中，1-2 胎母豬所產(chǎn)仔豬斷奶時(shí)Mhyo陽(yáng)性比例為 33%，而 3 胎及以上斷奶仔豬21% (Fano et al. 2006)。母豬和仔豬的管理操作似乎是仔豬感染的風(fēng)險因素。陽(yáng)性豬只比例偏高、豬群更新率偏大、產(chǎn)房過(guò)大、哺乳仔豬臥睡溫度低、較長(cháng)的哺乳期等都會(huì )增加斷奶時(shí)感染機率(Nathues et al. 2013a, 2013b; Pieters et al. 2014; Vangroenweghe et al. 2015)。仔豬的交叉寄養也可能增加斷奶時(shí)感染機率。在大多數研究中，斷奶時(shí)的感染率一般為 0-15%。 斷奶后，被感染仔豬與較大仔豬混群飼養，這就增加了病原傳播的可能性。斷奶時(shí)仔豬病原感染率已經(jīng)被提出作為預測育肥后期豬只疾病嚴重程度的因子(Fano et al. 2007; Sibila et al. 2007b)。比如，在封閉的飼養環(huán)境中，以每4周 1：1 的傳播速率，在1月齡的斷奶時(shí)豬群2%的陽(yáng)性率，在斷奶后第 2、3、4、5 月時(shí)，豬群陽(yáng)性率分別達到 4%、8%、16%、32%；而如果斷奶時(shí)感染率為6%，則相同時(shí)間感染率分別為 12%、24%、48%、96%。在一個(gè)連續流動(dòng)的生產(chǎn)系統中，通過(guò)與大日齡高感染率豬只直接接觸或間接共用養殖環(huán)境都會(huì )加劇病原的傳播(Giacomini et al. 2016; Vranckx et al. 2012)。在兩點(diǎn)或者三點(diǎn)生產(chǎn)系統中，EP 通常表現在育肥的中后期；然而在 一 點(diǎn)式系統中，最早在 8 周齡就能觀(guān)察到 EP 癥狀。通過(guò)研究農場(chǎng)和生產(chǎn)系統間的差異因素，包括欄舍類(lèi)型、通風(fēng)系統、飼養密度、氣候條件、系統類(lèi)型（日齡階段分布、一、二、三 點(diǎn)式飼養系統）等，發(fā)現其對豬群中豬肺炎支原體的動(dòng)態(tài)和嚴重性非常重要(Giacomini et al. 2016; Vranckx et al. 2012)。另外，其它病原或毒性物質(zhì)都會(huì )影響疾病的癥狀(見(jiàn)“致病機理”章)。 運用分子生物學(xué)的方法可以更好的研究豬肺炎支原體菌株間的差異性和流行性。在養殖密度較低或病原流行率較低的地區，通常在被感染的畜群中只能檢測到單一的豬肺炎支原體(Mayor et al. 2007; Vranckx et al. 2012)；而在養殖密度較大地區，豬群中經(jīng)?？梢詸z測到多種病原(Michiels et al. 2017; Nathues et al. 2011)。一項研究表明，感染菌株較多的豬群在屠宰時(shí)有更嚴重的 EP 病變(Michiels et al. 2017)。 （天邦生物技術(shù)） |